產(chǎn)品名稱:DNA含量檢測(cè)試劑盒(細(xì)胞周期)
產(chǎn)品型號(hào):CA1510
產(chǎn)品特點(diǎn):DNA含量檢測(cè)試劑盒(細(xì)胞周期)貨號(hào):CA1510規(guī)格:20T/50T保存:-20℃避光保存,一年有效。細(xì)胞周期是指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過程。
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DNA含量檢測(cè)試劑盒(細(xì)胞周期)
DNA Content Quantitation Assay(Cell Cycle)
貨號(hào):CA1510
規(guī)格:20T/50T
保存:-20℃避光保存,一年有效。
產(chǎn)品說明 :
細(xì)胞周期是指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過程。在這個(gè)過程中,細(xì)胞遺傳物質(zhì)復(fù)制并加倍,且在分裂結(jié)束時(shí)平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去。細(xì)胞周期又可以分為間期和有絲分裂期,細(xì)胞間期常劃分為休眠期(G 0 ) ,DNA 合成前期(G 1 ) ,DNA 合成期(S) ,DNA 合成后期(G 2 ) ,整個(gè)周期可表示為 G 1 →S→G 2 →M。DNA 周期檢測(cè)可用來反應(yīng)細(xì)胞周期的各個(gè)期的狀況,即細(xì)胞增殖狀況。利用細(xì)胞內(nèi) DNA 能夠和熒光染料(如碘化丙啶 PI)結(jié)合的特性,細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其 DNA 含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同,流式細(xì)胞儀檢測(cè)的熒光強(qiáng)度也不一樣。
細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),由于胞漿和染色質(zhì)濃縮,核裂解,產(chǎn)生凋亡小體,使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。
在細(xì)胞凋亡的早期,細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低,對(duì) 90°角光散射的能力增加或沒有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期,前向角和 90°角光散射的信號(hào)均降低。因此可以通過流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞光散射的變化來觀察凋亡細(xì)胞。用 PI 對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,凋亡細(xì)胞由于總 DNA 量降低,于正常 G 0 /G 1 細(xì)胞群前出現(xiàn) DNA 低染細(xì)胞群,即 G 1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G 1 ),即細(xì)胞凋亡群。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞(懸浮、貼壁)的 DNA 含量(細(xì)胞周期)檢測(cè)。
試劑盒組成 :
試劑名稱 | CA1510-20T | CA1510-50T | 保存條件 |
RNase A | 2.0mL | 5.0mL | -20℃ |
PI 染色液 | 8.0mL | 20.0mL | -20℃避光 |
使用方法 :( 僅供參考 )
1, 用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)設(shè)立陰性對(duì)照組,并收集細(xì)胞。
2, 用 PBS 洗滌細(xì)胞一次,1500rpm,5min 離心收集,調(diào)整細(xì)胞濃度為 1×10 6 /ml,取 1ml 單細(xì)胞懸液。
3, 制備的單細(xì)胞懸液離心后,去除上清,在細(xì)胞中加入 70%預(yù)冷乙醇 500ul 固定 2 小時(shí),4℃保存,染色前用 PBS 洗去固定液;如需要,細(xì)胞懸液可用 200 目細(xì)胞篩網(wǎng)過濾一次。
4, 細(xì)胞沉淀中加 100µl RNase A 溶液,重懸細(xì)胞,37℃水浴 30min。
5, 再加入 400µl PI 染色液混勻,4℃避光孵育 30min。
6, 上機(jī)檢測(cè),記錄激發(fā)波長(zhǎng) 488nm 處紅色熒光。
注意事項(xiàng) :
碘化丙啶(PI)染色液保存和使用過程中應(yīng)注意避光。
PI 有毒,操作時(shí)應(yīng)戴手套,并避免污染。
熒光染料都存在淬滅問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
DNA含量檢測(cè)試劑盒(細(xì)胞周期)相關(guān)產(chǎn)品 :
12100 DMEM(H) 培養(yǎng)基 S2100 抗熒光衰減封片劑
C0080 碘化丙錠 PI 溶液( 1mg/ml )
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒
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相關(guān)文獻(xiàn):
《Effects of concentrated growth factors on the angiogenic properties of dental pulp cells and endothelial cells: an in vitro study》 作者:Huan JUN,Dou LEI,Yan QIFANG,Xu YUAN,Yang DEQIN 期刊:Brazilian Oral Research 影響因子:1.773 PMID:29898028
《Probiotic Bacillus subtilis CW14 reduces disruption of the epithelial barrier and toxicity of ochratoxin A to Caco-2?cells》 作者:MengxuePengaJiaweiLiuaZhihongLiangabc 期刊:Food and Chemical Toxicology 影響因子:3.977 PMID:30763683
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