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甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒

操作步驟：

一、 TG 的提取：

1、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清待測(cè)。

2、 細(xì)胞、細(xì)菌：先收集 400-500 萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加 1mL 試劑一，超聲波破碎 1min（強(qiáng)度 20％，超聲 2s，停 1s），8000g， 4℃離心 10min，取上清待測(cè)。

3、 血清（漿）等液體樣品：直接測(cè)定。

二、 測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 420 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 水浴鍋預(yù)熱到 65℃。空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管雙蒸水（μL） 40 標(biāo)準(zhǔn)液（μL） 40 TG 待測(cè)液（μL） 40 試劑一（μL） 125 125 125 試劑二（μL） 25 25 25 加試劑一后充分混勻，再加試劑二，劇烈振蕩 30s，靜置，待分層后取上層溶液 30μL，置于新的 EP 管中。

3．甘油三酯含量測(cè)定：空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管上層溶液（μL） 30 30 30 試劑三 （μL） 100 100 100 試劑四（μL） 30 30 30 充分混勻，65℃水浴 3min 試劑五（μL） 100 100 100 試劑六（μL） 100 100 100 充分混勻，65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板測(cè)定 420nm 處吸光度，記為 A 空，A 標(biāo)和 A 測(cè)。注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒

a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1. 血清（漿）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）×100 mL =100×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL；100mL：血清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量： (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷Cpr =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量（mg/ g）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷W =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL。

b.使用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1. 血清（漿）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）×100 mL =100×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL；100mL：血清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量： (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷Cpr =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量（mg/ g）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷W =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。

2. 加試劑二后需劇烈震蕩，使待測(cè)液中甘油三酯得到充分提取。

3. 檢出限為 100μ mol/L。

試劑一：自備，取玻璃空瓶，加入 45mL 正庚烷，80mL 異丙醇，蓋緊后混勻，4℃保存。

劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品：液體 5mL×1 瓶，1mg/mL 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃保存。

相關(guān)文獻(xiàn):

《Correlations of MMP-1, MMP-3, and MMP-12 with the degree of atherosclerosis, plaque stability and cardiovascular and cerebrovascular events》 作者:WEI HU, RUI WEI, LIYUE WANG, JINGQIAN LU,HONGMING LIU and WEI ZHANG 期刊:EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE  影響因子:1.448 PMID:29434795
《Strontium ranelate-induced anti-adipocytic effects are involved in negative regulation of autophagy in rat bone marrow mesenchymal stem cells》 作者:Zhenbin Xu,Xizhuang Bai 期刊:International Orthopaedics 影響因子:2.384 PMID:29717341
《Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease》 作者:Jieyong Xing Yanshao Liu Tao Chen 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:29399085